UHPLC色譜柱的基本原理是利用混合物各組分在某一物質(zhì)中的吸附或溶解性能分配的不同，或其親和性的差異，使混合物的溶液流經(jīng)該種物質(zhì)進(jìn)行反復的吸附或分配作用，從而使各組分分離.色譜法在有機化學(xué)中的應用主要包括分離混合物，精致提純化合物，鑒定化合物，觀(guān)察一些反應是否完成等等；吸附色譜主要以氧化鋁、硅膠等為吸附劑，將一些物質(zhì)自溶液中吸附到它的表面，而后用溶劑洗脫或展開(kāi)，利用不同化合物受到吸附劑的不同吸附作用，和它們在溶劑中不同的溶解度，也就是利用不同化合物在吸附劑和溶液之間的分布情況不同而得到分離。吸附色譜分離課可采用柱色譜和薄層色譜兩種方式。
UHPLC色譜柱使用注意事項：
·使用時(shí)請按照色譜柱標簽上的箭頭方向來(lái)進(jìn)行通液操作。
·請確認系統壓力計的數值為零后再進(jìn)行色譜柱的拆卸。
·柱壓以100Mpa左右為上限基準。連續在上限壓力附近使用以及壓力急劇變化的情況都會(huì )造成色譜柱使用壽命縮短，請多加注意。使用乙腈作為流動(dòng)相時(shí)，推薦流速為色譜柱50*2.0mm l.D.時(shí)0.3~0.8mL/min，50*3.0mm l.D.時(shí)0.6~1.8mL/min左右。柱壓會(huì )根據柱長(cháng)、柱溫、以及有機溶劑種類(lèi)的不同發(fā)生變化，請適當調整流速。
·從水性溶劑到非水性溶劑都可使用，但在不同的溶劑之間進(jìn)行反復置換會(huì )導致分析柱的性能降低。一般可使用的有機溶劑為乙腈，甲醇，四氫呋喃(THF)等。使用THF時(shí)請注意PEEK管材的耐有機溶劑性能。
·如需置換流動(dòng)相，請注意有機溶劑之間的混合性和鹽的析出現象。另外為了使樣品和溶解樣品的溶劑中所含鹽類(lèi)不發(fā)生析出現象，請確認他們對于流動(dòng)相的混合性后再進(jìn)行注入。
·樣品盡量使用和初期流動(dòng)相同一組成的溶劑來(lái)進(jìn)行溶解。如使用溶解性比流動(dòng)相更高的溶劑，峰可能會(huì )變寬，并導致分離度和重現性下降。
·為了預防因篩板的堵塞而引起的柱壓上升，流動(dòng)相及樣品溶液請預先使用0.2um以下的過(guò)濾膜進(jìn)行過(guò)濾。
